Европейский гнилец

СОДЕРЖАНИЕ СТАТЬИ

1. ОБЩЕЕ ОПИСАНИЕ .. 1

2. ОПИСАНИЕ Возбудителя .. 2

3. ПАТОГЕНЕЗ . 5

5. ПРОФИЛАКТИКА .. 5

6. МЕРЫ БОРЬБЫ .. 6

ОБЩЕЕ ОПИСАНИЕ

Это инфекционная болезнь пчелиных семей, которая приводит к гибели расплода в возрасте 3-4 дней, иногда старше. Случается во всех климатических зонах нашей планеты. Больные семьи уменьшают производство воска вдвое, медовую производительность – на 20-80%, выход расплода снижается на 30-45%.

Европейский гнилец поражает открытый расплод ранней весной и летом. Инкубационный период составляет 36-72 часа. Различают явную и скрытую форму болезни. При скрытой форме возбудитель может быть в организме пчел, маток, личинок, в меде, перге, сотах, но клинических признаков болезни нет.

Для явной формы характерна легко обнаруживаемая гибель личинок. Различают три степени поражения пчелиной семьи: сильный, средний и слабый. При слабой степени в семье бывает 5-10 больных личинок, при средней – от 10 до 50, при сильной – более 50 личинок на каждой соте.

Течение болезни зависит от условий содержания и кормления пчел. Поэтому считается, что вызывают условно патогенные возбудители. В большинстве случаев болезнь возникает в слабых и необеспеченных кормами семьях, где голодают личинки. Особенно поражает европейский гнилец семьи, ослабленные ядами. В неутепленном гнезде создаются условия развития болезни. Наибольшее ее развитие наблюдается в начале медосбора. Во время максимального взятка болезнь идет на убыль, иногда ее признаки исчезают. Создается впечатление, что семьи поправились. В этот период расплода мало, соты заняты медом. После окончания медосбора болезнь усиливается и продолжается, пока в семье есть расплод.

Семьи, пораженные европейским гнилеццем, зимуют хуже, чем здоровые. Через две недели после выставления из зимовщика развитие больных семей тормозится, хотя клинические признаки болезни в настоящее время еще не наблюдаются.

Течение заболевания зависит от вида возбудителя, его патогенности, времени инфицирования личинок. Когда гибнут личинки старшего возраста, европейский гнилец может быть воспринят как мешковатый расплод, а если запечатаны, как американский гнилец. Случается и форма, смешанная с мешковатым расплодом или с американским гнилеццем.

У взрослых пчел заболевание имеет скрытую форму или характеризуется общей слабостью, пониженной работоспособностью, безразличием к защите гнезда, преждевременным срабатыванием особей. В начале заболевания подвижность личинок повышается, поэтому меняется их естественное положение в ячейках. Больные личинки теряют блеск, тургор, становятся матовыми, затем желтеют. Их кожура становится прозрачной, через нее просматривает вытянутая вдоль тела средняя кишка, заполненная серовато- или желтовато-белым содержимым, хорошо видны трахеи. Через несколько дней после гибели кожица и другие ткани личинок приобретают мягкую консистенцию. В таком состоянии гниения кожица легко рвется, и личинку не удается целой вытащить из ячейки (трупы тестообразные, тягучей консистенции). После гибели личинки постепенно высыхают и превращаются в темно-коричневую корочку, лежащую на нижней стенке ячейки или в нижнем ее углу. Кожицы легко и полностью отделяются пинцетом или другим предметом от стенок ячеек.

Гнилые личинки имеют кислый запах, а некоторые трупы запах гнилого мяса.

На начальной стадии болезни пчелы успевают вычищать открытые ячейки от трупов личинок, при запущенной – в запечатанном расплоде имеются погибшие личинки, которые становятся тягучими, высыхают и крепко прикрепляются к ячейкам. Этот признак присущ американскому гнилеццу. Больной расплод имеет пестрый вид, крышечки ячеек темнеют и проваливаются.

ОПИСАНИЕ Возбудителя

В каждом случае может быть один или несколько видов микробов: стрептококк (мелисококк), плютон, бацилла альвей, стрептококк апис, энтерококус фекалис, бацилла орфеус. Кроме этих возбудителей, при европейской гнилецце могут быть и другие, но они не способны вызвать эту болезнь.

Некоторые авторы считают, что под названием "европейский гнилец" подразумевается два или три заболевания пчелиного расплода разных по этиологии, но сходных по клиническим признакам.

Стрептококк плютон – это клетка удлиненной формы (рис.1), стенка которой плотная и очень тонкая. Цитоплазматическая мембрана, как правило, одноконтурна. Цитоплазма плотно заполнена гранулярным компонентом, поэтому отдельные рибосомы выделяются нечетко. Разделяются клетки в результате образования поперечных перегородок. Ядровый компонент находится в цитоплазме. Микроб имеет форму вытянутых (ланцентообразных) кокков размером 0,5-1,5 мкм (рис.2). В мазках они располагаются поодиночке, чаще попарно, цепочками или посредством скоплений, розеток; в культуре и в тканях образуют капсулу, содержащую несколько кокков, хорошо окрашиваемых по методу Кленбергера, Томчика и Новелли. Микроб спор не образует. Стрептококки окрашиваются всеми анилиновыми красками и по Грамму ; иногда бывают и грамотрицательные коки.

Рис.1. Стрептококк плютон

Рис.2. Ланцетовидные коки стрептококка.

Из патологического материала стрептококк плютон выделяют культивированием посевов при 35 градусах С на средах Бейли и Черепова в анаэробных условиях. Для этого используют данаэростат или эксикатор, в который после вставления чашек или пробирок с посевами нагнетают углекислый газ (5-10% CO). Затем культивирование выделенных штаммов этого возбудителя возможно и в аэробных условиях. Для культивирования используют среду Бейли. В его состав входят: дистиллированная вода 1 л, глюкоза, растворимый крахмал и экстракт дрожжей – по 10 г, калий фосфорнокислый однозамещенный – 13,6 г, агар-агар растительный 20 г. Среду стерилизуют в автоклаве при 116 градусах С три дня подряд по 20 мин. В первом посеве возбудитель на этой среде начинает расти через 4-7 суток, в последующих через 24-48 часов.

Среда Черепова: в 1 л водопроводной воды кладут 300 г почищенного картофеля (обязательно удаляют ячейки), варят 15-20 мин. не допуская разваривания, отфильтровывают через ватно-марлевый фильтр и к 1 л фильтрата добавляют 2% растительного агар-агара, С г пептона. Смесь стерилизуют в автоклаве при давлении 1 атм. 20 мин., затем добавляют 3% экстракта пекарских дрожжей и 3% глюкозы РО 6.8. Стерилизуют в аппарате Кока 3 дня до 30 мин. или в автоклаве при давлении 0,5 атм. С дня по 15 мин.

Полуредкий 0,15%-ный картофельный агар приготовлен аналогично среде Черепова, только с тем отличием, что вместо 2% добавляют 0,15% растворимого агар-агара.

На твердых средах стрептококки образуют мелкие круглые, выпуклые, зернистые перламутрово-белого цвета, непрозрачные колонии диаметром 1-16 мм. В печеночном бульоне и полужидком агаре он растет, образуя мутное нежное пристенковое кольцо, на дно пробирки через 2 дня выпадает белый осадок.

Стрептококк ферментирует глюкозу и фруктозу без образования газа, не ферментирует глюкозу и фруктозу без образования газа, не ферментирует сахарозы, галактозы, лактозы, мальтозы, рафинозы, рамнозы, маннита, сорбита, инозита, аксилозы, глицерина и крахмала.

Стрептококк плютон сохраняет жизнеспособность в сухом содержимом среднего отдела кишечника личинки и в трупах-кожишках при комнатной температуре до трех лет. У меда на солнечном свете возбудитель болезни сохраняется 3-4 часа, у меда в темноте при комнатной температуре - 3-7 месяцев, в 10% растворе забраживающего сахара при 37 градусах С - 3-5 дней, при комнатной температуре 11 -21 день, в 20% растворе бродящего меда - более месяца, в пастообразной кашке из перги и воды при комнатной температуре – 10 месяцев; на пасеке летом: на ульях – 50-55 дней, на сотах – 40-45, на медогонках – 45-48, на утеплительных тканях с прополисом 21-24 дня, у меда 8-15 дней, вощине 55-65, перге 365 дней; в воде 79-84 дня; на спецодежде пчеловода 95 дней.

Во время нагревания микробной смеси до 60 градусов С плутон погибает за 10-15 мин., в растворе фенола в разведении 1:60 за 15 мин., 1:70 за 20, 1:90 за 10 мин.; в осветленных растворах хлорной извести с содержанием 1,1% активного хлора за 30 мин., в 3%-ном растворе однохлористого йода за 20 мин. в 0,5%-ном марганцево-кислом калии за 30, а в 5%-ном за 1мин.. в 0,5%-ном растворе формальдегида – за 10 мин.

Бациллы альвуй-палочка, ее клеточная стенка – трехслойная. Слои клеточной стенки примерно одинаковы. Цитоплазматическая мембрана трехслойная. Цитоплазма имеет гранулярное строение. Споры бациллы альвей-пятиугольной формы, имеют густую гомогенную оболочку с неравномерными выступами, по которой широкая зона кортекса, состоящая из 7 слоев. В центре споры есть спороплазма. Споры также многослойны, расположенные в центре клетки (рис.3).

Рис.3. Бацилла альвей со спорой в центре клетки

Бацилла альвей (рис.4) окрашивается положительно по Грамму, подвижна. Споры располагаются центрально, 2,5-4 мкм в длину и 0,8-1,5 мкм в ширину, иногда образуют ряды в виде частокола (рис.4.2). Возбудитель-факультативный аэроб, произрастающий при температуре 37 градусов С на обычном МПА и МПБ, кровяном агаре Цейслера, через сутки образует на агаре большие колонии неправильной формы в виде оленьих рогов (рис.5). На агаре Цейслер образует гемолиз. Бульон мутнеет равномерно, на 3-5-й день на его поверхности образуется бесцветная или сероватая гладкая и нежная пленка со слабым пристеночным кольцом, во время встряхивания она падает на дно пробирки в виде ваты. Бацилла альвей медленно разжижает МПЖ, молоко сквашивает и пептонизирует, образует индол, бывают следы аммиака и сероводорода, крахмала не гидролизует, нитритов не восстанавливает, ферментирует глюкозу, мальтозу, глицерин, лактозу, сахарозу с образованием кислот. Биохимические свойства неустойчивы. Старые культуры обладают неприятным запахом, особенно сильным, если культивировать микробы на кровяном агаре. Споры бациллы альвей очень жизнеспособны. В кожицах личинок они хранятся более 20 лет, в неотапливаемых помещениях, а также при температуре 35-37 градусов С выживают на деревянных и металлических поверхностях, ульевых полотнах, сотах, искусственной вощине; в меде – до 450 дней, в перге и медоперговой смеси до 171 дня.

Рис.4. Бациллы альвей: 1- палочки; 2 – споры (типичное расположение в виде частокола)

Рис.5. Типичная форма колоний бацилл альвей в виде оленьих рогов

В 2%-ном растворе марганцовокислого калия споры погибают за 7 ч., в 5%-ном - за 1 ч., в 2%-ном растворе хлорамина при температуре 40 С - через 6-12 ч., в 0,5 % -ном растворе хинозола через 5-45 мин., а в 1%-ном - через 5 мин., в 0,1%-ном растворе трипафлавина - через 45 мин., а в 0,4%-ном - через 20 мин., в 5%-ном растворе хлоронола - через 45-60 мин., а в 15%-ном - через 10-30 мин. , в 5%-ном растворе хлорной извести - через 45-60 мин., в 10%-ном - через 20-30 мин.

Резистентность вегетативных форм бациллы альвей невелика. При температуре 100 градусов С или во время действия 0,1% раствора хинозола они погибают через 5 мин. В воске при 120 градусах С споры погибают через 2 часа. Перекись водорода, однохлористый иод. едкий натрий, каустифицированная содопоташная смесь (температура раствора 60 градусов С), щелочной раствор мальдегида, 0,1-0,3%-ный бета-пропилактан убивают споры от 5 мин. до 3 час. Споры бациллы альвей погибают от действия оксида этилена в камере, когда начальный вакуум 550 мм рт. ст., концентрация газа с 1,5 кг на м ³ , температура 22-25 градусов С и относительная влажность воздуха 50-60 %, через 6 ч., при действии бромистого метила в камере при начальном вакууме 600 мм рт.ст. концентрации газа 3,5 кг на м ³ , температуры 22-25 градусов С и относительной влажности, близкой к полному насыщение, - через 24 часа.

Стрептококк апис – это круглые клетки (рис.6) с однослойной стенкой и одноконтурной цитоплазматической мембраной. Цитоплазма состоит из мелкогранулярного вещества. Электронограмма дает возможность дифференцировать стрептококка апис от стрептококка плютон.

Рис.6. Стрептококк описание

Стрептококк апис живет при температуре 35-37 градусов С на поверхностях улья, сотах, вощине, у меда до 256 дней, в перге и медоперговой смеси до 129 дней, в сахарном сиропе и водопроводной воде – до 14 дней. На деревянных поверхностях, сотах, вощине, у меда в неотапливаемых амбарах – до 265 дней. В пробирке при температуре 78 градусов С он погибает за 30-35 мин, в разбавленном феноле 1:60 и 1:70 за 30 мин, а 1:90 за 50 мин, в растворах хлорной извести с наличием 2% активного хлора за 30 мин., в 0,5% растворе марганцовокислого калия за 50 мин., в 5%-ном за 5 мин. Есть данные о том, что в высушенном состоянии на стекле, вате, бумаге, дереве и хлопковой ткани он жизнеспособен до трех лет. Нагрев до 60-70 градусов С убивает его за несколько минут.

Стрептококк апис располагается в мазках короткими цепочками, размер отдельных коков 0,7-0,9 мкм, грамположительный, спор не образует, капсулы не имеет; факультативный аэроб, хорошо произрастающий при температуре 37 градусов С на обычных питательных средах, а также на средах Бейли, Черепова, кровяном агаре Цейслера. Через 24 часа. на агаре образуются мелкие, прозрачные, бесцветные колонии, легко снимаемые петлей и суспензирующиеся в физрастворе. Микроб вызывает помутнение бульона, разжижает МПЖ, молоко от него скисает и пептонизируется, индола и сероводорода не образует, выделяет очень мало аммиака, углеводы ферментирует с образованием кислоты, крахмала не гидролизует, нитритов не восстанавливает, на кровяном.

Споры бациллы орфеус погибают при кипячении в воде через 15 мин.; 2% раствор хлорамина при температуре 40 градусов С убивает их за 210 мин. резистентность бациллы орфеус к физическим и химическим факторам такая же, как и бациллы альвей.

Патогенность

К европейскому гнилеццу восприимчивы пчелы и осы. Его возбудителям присущи неодинаковые патогенность и вирулентность, что зависит от их количества. Чем выше доза микробов, попадающих в организм личинки, тем сильнее патологические явления. Зависят они также и от биологических особенностей разных штаммов. Но эти особенности микробов изучены недостаточно. Искусственно заразить пчел не всегда удается. Возбудители европейского гнилецца снижают или теряют свои болезнетворные свойства, когда культивировать их на искусственной среде. Заразить пчел природным материалом (взвесь погибших от европейского гнилецца личинок) легче, чем культурами, полученными на искусственных питательных средах.

Большинство возбудителей европейского гнилецца могут действовать патогенно не только самостоятельно, но и как синергисты, дополняя и усиливая болезнетворные свойства друг друга.

Стрептококки плютон и апис патогенны для незапечатанных личинок пчел и ос; теплокровные животные не заражаются. Бациллы альвей патогенны не только для личинок пчел, но и для мух, большой восковой моли, личинок совки, а также для мышей, кроликов и морских свинок. Мыши, которых заражали подкожно, погибали через 24 часа, а морские свинки и кролики через 6 дней. Бацилла орфеус после введения в гемолимфу патогенна для червя шелкопряда, гусеницы большой восковой моли.

Источником болезни есть больные и мертвые личинки. Распространяют возбудителя болезни в семье кормящей пчелы, а в другие семьи заносят блуждающие пчелы, пчелы-воровки и трутни. Осы также переносят возбудителей и заражают пчелиные семьи и гнезда ос. Здоровые семьи заражаются в результате переставления сотов с расплодом, медом, пергой и пустых из неблагополучных в отношении американского гнилецца семей, а также использования ульев от больных семей без дезинфекции. Приобретение пакетов, маток, семей из неблагополучных пасек приводит к распространению болезни, заражению благополучных семей и пасек.

ПАТОГЕНЕЗ

В течение первых трех дней личинки иммунны к вредному действию возбудителя. Это можно объяснить тем, что молоко, которым пчелы-кормилицы кормят личинок, обладает защитными свойствами. Кроме того, это вещество попадает из организма пчелы, имеющей возрастной иммунитет против этих возбудителей, непосредственно в пищеварительную систему личинки. Личинки заражаются, начиная с третьего дня и позже, когда им пчелы-кормилицы вносят в корм мед и пергу. Возбудитель проходит в эпителии средней кишки личинки, где и размножается. Затем он попадает в гемолимфу и распространяется в других тканях. Для болезни характерна септицемия, когда возбудитель беспрепятственно распространяется и размножается в гемолимфе и других тканях личинки. В живых тканях первым размножается стрептококк плутон. Затем болезнь осложняется действием вторичной микрофлоры, чем в мертвых тканях и преобладает вторичная микрофлора.

Медленное развитие заболевания, может быть, разъясняется тем, что поначалу заражаются старшие личинки, питающиеся медом, также тем, что вначале возникновения заболевания расплод заражается маленьким количеством возбудителя.

Иногда личинки, больные европейским гнилем, становятся будто здоровыми. После запечатывания в ячейках вместо шелковистой нити они выделяют жирообразную жидкость, содержащую возбудителей. Этой жидкостью больные личинки смазывают внутренние стенки ячейки и крышечки. Пчелы, развившиеся из больных личинок во время прогрызания крышечки и очистки ячейки инфицируются. Затем заражают расплод, распространяя болезнь в пчелиной семье. В этом случае течение болезни бывает в виде острой вспышки.

Диагноз ставят, учитывая характерные признаки заболевания, по результатам микроскопических, бактериологических и серологических исследований. Необходимо убедиться, что нет американского гнилецца и мешковатого расплода. Следует также учитывать возможность смешанного течения упомянутых болезней в одной пчелиной семье и на пасеке.

ПРОФИЛАКТИКА

Щоб запобігти появі європейського гнилеццю, на пасіках, потрібно утримувати сильні сім'ї. Сильними вони бувають переважно тоді, коли постійно забезпечені доброякісним кормом, своєчасно і добре утеплені, знезаражені та коли всі роботи проводяться згідно з технологічним регламентом. На зиму бджолині сім'ї повинні бути забезпечені достатніми запасами корму та відповідно утеплені з урахуванням достатньої вентиляції. Необхідно своєчасно вибраковувати гніздові (стільники з чорними стінками, що не просвічуються, а також стільники із запліснявілою пергою, закисаючим медом, забруднені калом бджіл. Такі стільники перетоплюють на віск. Необхідно обновлювати третину гніздових стільників за рахунок відбудови нових із вощин.

Враховуючи, що на європейський гнилець хворіють не всі сім'ї, а ступінь ураження буває різний, для розведення слід використовувати маток, виведених від маток із стійких проти хвороби сімей. Слабкі сім'ї, які погано розвиваються, треба вибраковувати. Потомство маток із таких сімей не повинно розмножуватись, тому цих маток замінюють на дочок із стійких сімей.

Вулики, пасічницький інвентар, спецодяг та інше пасічницьке обладнання не можна передавати на іншу пасіку без попереднього знезараження.

Порожні вулики, вставні та стельові дощечки, полотнини, інвентар, обладнання та спецодяг очищають І дезінфікують на дезінфекційних майданчиках із закритою ямою для. стічних вод. Підмор і сміття з дна вулика збирають та спалюють. Вологі утеплювальні подушки замінюють сухими, а зволожені підсушують. У теплу погоду (не нижче 10 градусів С у тіні) сім'ї пересаджують у чисті знезаражені вулики. Гнізда сімей, особливо слабких, зменшують і добре утеплюють. Порожні рамки із стільниками знезаражують та зберігають у сухих і добре провітрюваних приміщеннях, бажано, з температурою не вище 10 градусів С, щоб їх не руйнувала воскова міль.

Пасіки слід розташовувати в сухих і добре захищених від вітру місцях з весняним пожитком нектару та пилку. В кожній бджолиній сім'ї весною слід мати 10 кг меду, а також 1-2 рамки з пергою. У міру розвитку бджолиних сімей гнізда поступово розширюють, вставляючи світлокоричневі стільники, а при наявності медозбору - вощину. У спеку не можна допускати перегрівання вуликів.

Весною, якщо мало перги, немає пилкового взятку, сім'ї підгодовують медо-перговою або медо-білковою сумішшю. Ці суміші повинні бути у вигляді твердого тіста, замішані в цукровій пудрі.

ЗАХОДИ БОРОТЬБИ

Якщо виявлено європейський гнилець, на пасіку накладають карантин та вживають заходів відповідно до інструкції про заходи з профілактики та ліквідації пошесних хворіб бджіл.

Боротьба з європейським гнилеццем зводиться до комплексу санітарно-лікувальних заходів, (які включають поліпшення умов утримання бджіл, застосування лікувальних препаратів, проведення дезінфекції вуликів, рамок та всього інвентаря. Гнізда хворих сімей зменшують, для чого забирають порожні та зайві стільники з медом; слабкі бджолині сім'ї об'єднують по 2-3 в одну, маток замінюють. Гнізда утеплюють.

Лікування проводять так само, як і від американського гнилеццю. Якщо вирішили застосовувати антибіотики, то тільки ті, які були ефективними під час перевірки в лабораторіях ветеринарної медицини.

Щоб запобігти утворенню стійких проти препарату мікробів та підвищити ефективність лікувальних препаратів, рекомендується чергувати лікарські засоби. Наприклад, якщо протягом одного сезону застосовували стрептоміцин, то в наступному слід скористатися тетрацикліном або якимсь іншим препаратом. Таку заміну треба робити за рекомендацією спеціалістів лабораторії ветеринарної медицини.

Бджолині сім'ї, що не піддаються лікуванню, а також ті, в яких виявлено захворювання не тільки відкритого, а й запечатаного розплоду, треба перегнати. Стільники з великою кількістю хворих личинок забирають із гнізда і перетоплюють на віск.

Якщо багато здорового запечатаного розплоду, після переганяння хворих сімей його вирощують у спеціально призначених бджолиних сім'ях-інкубаторах.

Для оздоровлення бджолиних сімей і з метою профілактики доцільно використати підрамковий простір близько 0,6 м. Він застосовується з метою виключення можливості контакту бджіл з підлогою, де в смітті є збудники. Бджоли ретельно очищають комірки і якщо збудники не повертатимуться до гнізда з підлоги, настане оздоровлення. Створити такий великий підрамковий простір не завжди можливо, бо потрібна перебудова вулика-лежака, а в багатокорпусних це зробити просто підставити 2-3 корпуси. У стінках підрамковото простору не повинно бути отворів. Через такі отвори проходитиме світло. На нього поспішатимуть бджоли-охоронці й ті, що перший раз ідуть на обліт, а це не бажано.

Вулики, пасічницький інвентар, устаткування, спецодяг, територію пасіки дезінфікують так само, як і при американському гнилецці. Порожні стільники знезаражують зволоженням із гідропульта або машини ЛСД розчином 2 %-ного перекису водню та 1 %-ного мурашиної (або оцтової) кислоти чи 5 %-ного розчину однохлористого йоду; експозиція - 24 год. Після цього стільники промивають та просушують. Стільники можна також дезінфікувати параформаліновим способом.

З воском і медом із неблагополучних пасік поступають так само, як і при американському гнилецці.

Пасіку вважають оздоровленою і знімають карантин через рік після ліквідації хвороби та остаточної дезінфекції.

П. Я. Хмара, кандидат біологічних наук

Журнал “ Пасіка ” №3 1999 рік